黃qu霉毒素B1檢測(cè)試劑盒
黃qu霉毒素B1檢測(cè)試劑盒
說(shuō)明書(shū)
本測(cè)試盒用間接競(jìng)爭(zhēng)免疫分析法定量測(cè)定谷物中AFB1。該測(cè)試盒反應(yīng)孔可拆卸,可測(cè)單份樣品,也可測(cè)多份樣品。定量分析時(shí)需有含450nm波長(zhǎng)的微孔板酶標(biāo)儀。
1 概要
黃qu霉毒素是由qu霉菌屬的黃qu霉和寄生曲霉等產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物,主要污染玉米、花生、堅(jiān)果等。天然污染的黃qu霉毒素以AFB1為主,AFB1具有*的急性du性和致ai性,肝臟是其主要的靶器官。
AFB1檢測(cè)方法主要有薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)和ELISA方法,本試劑盒是以應(yīng)用單克隆抗體為基礎(chǔ)的ELISA檢測(cè)方法,可以準(zhǔn)確快速檢測(cè)糧谷類(lèi)、花生及飼料中的AFB1。
2 測(cè)定原理
本試劑盒采用固相酶聯(lián)免疫吸附原理,利用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法進(jìn)行測(cè)定。用抗原包被微孔板,加入AFB1標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、抗AFB1單克隆抗體進(jìn)行孵育后,將未與包被抗原結(jié)合的抗體洗去;再加入酶標(biāo)記的抗鼠IgG抗體孵育,加入顯色液,經(jīng)過(guò)終止液終止后,用酶標(biāo)儀在450nm處測(cè)定OD值。
3 提供的物品
微孔板
5個(gè)濃度的AFB1標(biāo)準(zhǔn)溶液(各1mL)
標(biāo)準(zhǔn)1:0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)2:0.2ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)3:0.5ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)4:1.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
標(biāo)準(zhǔn)5:2.0ng/mL ……………………………………………………………直接使用
抗AFB1單克隆抗體溶液(6mL) …………………………………………直接使用
酶標(biāo)物(12mL) …………………………………………………………… 直接使用
顯色液(12mL) ……………………………………………………………直接使用
終止液(6mL) ……………………………………………………………………直接使用
濃縮洗液(30mL) ………………………………………………………………稀釋使用
4 盒中未提供,需自備物品
微孔板酶標(biāo)儀(含450nm)、振蕩器、粉碎機(jī)、微量移液器
量筒、漏斗、容量瓶、快速定性濾紙
氯化鈉(分析純)、甲醇(分析純)、去離子水或蒸餾水
5 操作者注意事項(xiàng)
標(biāo)準(zhǔn)溶液中含有AFB1,應(yīng)特別小心。
使用過(guò)的玻璃容器及AFB1溶液用pH7.0的次氯酸溶液(10%v/v)浸泡過(guò)夜。
每次加樣后立即將所有試劑放回2~8 ℃。
每步加樣時(shí)間應(yīng)控制在5min內(nèi)。
孵育過(guò)程中應(yīng)避光。
不要使用過(guò)期試劑盒。
不要交叉使用不同批號(hào)的試劑盒中的試劑。
6 儲(chǔ)存條件
保存試劑盒于2~8℃。不要冷凍
顯色液對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
將不用的微孔板放進(jìn)原鋁箔袋中,置2~8℃保存。
7 試劑變質(zhì)的標(biāo)志
標(biāo)準(zhǔn)1的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm<0.5)時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。